產(chǎn)品名稱:胞內(nèi)鈣熒光探針 英文名稱:BAPTA-AM CAS號(hào):126150-97-8 規(guī)格:25mg 純度:95% |
脫氧熊果苷 53936-56-4 |
氯苯嘧啶醇標(biāo)準(zhǔn)溶液 60168-88-9 |
醋酸睪酮 1045-69-8 |
2-氨基-5-氯苯甲酸 635-21-2 |
九氟丁基磺酸酐 36913-91-4 |
氨甲環(huán)酸 1197-18-8 |
4-苯基二苯酮 2128-93-0 |
5-硝基-A-四氫萘酮 51114-73-9 |
N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸1-叔丁酯 34582-32-6 |
三氧化二鎳 1314-06-3 |
3-縮水甘油醚氧基丙基三乙氧基硅烷 2602-34-8 |
日落黃 2783-94-0 |
4-氨基-3-硝基苯酚 610-81-1 |
2-(三氟甲基)苯甲酰氯 312-94-7 |
3-溴乙基苯 2725-82-8 |
2,4-二氟溴芐 23915-07-3 |
4-硝基苯硫酚 1849-36-1 |
偏鋁酸鈉 11138-49-1 |
4-正丙氧基苯硼酸 186497-67-6 |
2-氯-5-(三氟甲基)苯硼酸 182344-18-9 |
三氯化碘 865-44-1 |
對(duì)甲苯基溴化鎂 4294-57-9 |
4-碘苯乙迷 699-08-1 |
(+)-α-蒎烯 7785-70-8 |
|N|,|N|'-二異丙基碳二酰亞胺 693-13-0 |
嘧啶磷同位素標(biāo)準(zhǔn)溶液 23505-41-1 |
1-甲基-2-吡咯羧酸 6973-60-0 |
探針式影像三坐標(biāo)測(cè)量儀、佛山三坐標(biāo)測(cè)量機(jī)
簡單說明:1、00級(jí)高穩(wěn)定性花崗石底座。2、采取瑞士TESA專利光學(xué)讀值測(cè)量系統(tǒng)。3、YR-3T多功能影像、探針互鎖量測(cè)軟件。4、臺(tái)灣制高耐磨V型導(dǎo)軌。 | ||||
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經(jīng)濟(jì)型手動(dòng)三坐標(biāo)測(cè)量機(jī)、龍門式三坐標(biāo)測(cè)量機(jī)
C型探棒|IP3X試驗(yàn)探棒|IP30試驗(yàn)探針
產(chǎn)品型號(hào):YVM-3020T
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貨號(hào):XY954400P18
火雞星狀病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
Turkey Astrovirus(TAstV)
產(chǎn)品及特點(diǎn):它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 RNA 模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)火雞星狀病毒高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
規(guī)格及成分:
編號(hào) | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | 探針法 qRT-PCR 緩沖液 | 500 μL(藍(lán)蓋) |
試劑二 | 探針法 qRT-PCR 酶混合液 | 100 μL(紅蓋) |
試劑三 | 熒光 PCR 專用模板稀釋液 | 1 mL(黃蓋) |
試劑四 | 火雞星狀病毒探針法qRT-PCR引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑五 | 火雞星狀病毒 qRT-PCR 探針 | 50 μL(棕色管) |
試劑六 | 火雞星狀病毒探針法qRT-PCR陽性對(duì)照(1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋) |
使用手冊(cè) | 1 份 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為 12 個(gè)月。
自備試劑: 樣品 RNA。
使用方法 一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供無傳染性的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 專用模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備:
7. 如果有 N 個(gè)樣品,設(shè)置 N+2 個(gè)提取,多出的一個(gè)是 PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)?梢杂 10μL 陽性對(duì)照的 10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為 NC。
8. 用自選方法純化樣品的 RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 RNA 提取試劑盒兼容。也可以選購本公司的柱式病毒 RNAout。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行):
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于 PCR 陽性對(duì)照(用第 4 號(hào)管的陽性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
成分 | 樣品管 N+2 個(gè) | RT-PCR陰性對(duì) 照管 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品管(2-7 管) |
探針法 qRT-PCR 緩沖液 | 各 10 μL | 10 μL | 各 10 μL |
探針法 qRT-PCR 酶混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 各 2 μL |
火雞星狀病毒 qRT-PCR 探針 | 各 1 μL | 1 μL | 各 1 μL |
火雞星狀病毒探針qRT-PCR引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 各 2 μL |
待測(cè)樣品 RNA 模板 | 各 5 μL | -- | -- |
超純水 | -- | 5 μL | -- |
第7步所得標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品稀釋液 (2-7 號(hào)) | 不加 | 不加 | 各 5 μL(2 號(hào)樣到 2 號(hào)管,3 號(hào)樣到 3 號(hào)管…) |
11. 蓋上蓋子后上機(jī),按下面參數(shù)進(jìn)行 qRT-PCR:
過程 | 溫度 | 時(shí)間 |
逆轉(zhuǎn)錄 | 50℃ | 30 min |
預(yù)變性 | 94℃ | 10 min |
qRT-PCR反應(yīng) (35 個(gè)循環(huán)) | 94℃ | 15 sec |
60℃
| 1 min,(采集 FAM 通道的熒光信號(hào))
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四、數(shù)據(jù)處理:
12. 如果把本試劑盒用于定量檢測(cè),則以陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品RNA 濃度的 log 值,再推算出其濃度。
13. 如果把本試劑盒用于定性檢測(cè),只判斷陽性或陰性,則陰性對(duì)照 Ct 必須大于或等于 40。陽性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長,有典型擴(kuò)增曲線,Ct 值應(yīng)該小于或等于 30。對(duì)待測(cè)樣品,如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性,如果小于或等于 35 則為陽性。如果在 35-40 之間,則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的 Ct值如果大于或等于 40 則為陰性,如果小于 40,則為陽性。
僅用于科研,不能用于臨床診斷!所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于人或動(dòng)物的治療等任何其他用途,不為任何個(gè)人提供產(chǎn)品和服務(wù)。
技術(shù)參數(shù):
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技術(shù)參數(shù):
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測(cè)量范圍 | 溫度T1:-20~+50℃(- 4~+122℉) 濕度:0~100%RH 濕球溫度:-21.6~50.0℃(-6.9~122℉) 露點(diǎn): -78.7~50.0℃(-109.7~122℉) 外置溫度T2: -20~+70℃(- 4~+158℉) |
分辯率 | 溫度T1:0.1℃/℉ 濕度: 0.1%RH 濕球溫度:0.1℃/℉ 露點(diǎn): 0.1℃/℉ 外置溫度T2:0.1℃/℉ |
準(zhǔn)確度 | 溫度:±0.6℃ 濕度:±2~3%RH |
顯示 | 液晶顯示器,同時(shí)顯示三組數(shù)據(jù)值。 |
反應(yīng)時(shí)間 | 60秒 |
操作環(huán)境 | 0-80%RH,0-50℃ |
尺寸 | 24.7(H) x 48.4(W) x 178.5mm(L) T2:導(dǎo)線長116cm ,把柄:15cm(包括探針) |
重量 | 重260克 |
供電電源 | 2*AAA電池 |
附件 | 攜帶盒,電池,使用說明書。 |
選購件 | 濕度標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)鹽灌:HR33,HR75,T2傳感器:VZ87P6 |